多维度单细胞分析揭示淋巴管畸形中的免疫功能障碍与炎症反应

淋巴畸形（Lymphatic malformations, LMs）是一类由淋巴管发育异常导致的先天性血管性疾病，可引起组织肿胀、外观畸形及严重并发症，但其循环系统中的细胞免疫表型及潜在分子机制尚未明确。本研究通过整合单细胞RNA（scRNA）测序、T细胞受体（TCR）测序及B细胞受体（BCR）测序技术，对LMs患者，具体亚型为中央传导淋巴管异常（Central Conducting Lymphatic Anomalies, CCLA）的外周血和胸腔积液样本，以及健康对照者的外周血样本进行免疫景观绘制。研究发现，LMs患者存在显著的免疫细胞组成失衡：促炎型CD14⁺CD16⁺单核细胞和非典型记忆B细胞（atMBCs）异常扩增，而在细胞杀伤和细胞毒性发挥关键功能的CD8⁺ T细胞和自然杀伤（NK）细胞数量减少且功能受损。

功能分析显示，CD14⁺ CD16^-单核细胞的抗原加工与提呈能力显著下降，这与转录因子REL和RFX5的表达水平和转录活性下调密切相关；CD8⁺ T细胞的分化轨迹受阻，无法正常向GZMB⁺效应记忆亚型转化，导致其杀伤功能减弱；NK细胞中发挥细胞毒性的CD56^lowCD16^high亚型比例降低，关键转录因子IRF1的表达及调控活性下降，且抑制性检查点HLA-E:CD94-NKG2A上调，可能共同介导了NK细胞毒性缺陷。细胞间通讯分析揭示，CXCL16-CXCR6相互作用参与炎症反应调控，而B细胞与其他细胞的信号传递能力受损，尤其是CD22相关免疫信号通路异常。此外，LMs患者的TCR/BCR库克隆性增加而幼稚T细胞多样性降低，提示抗原驱动的免疫细胞克隆扩增异常。

研究进一步鉴定出CD14⁺ CD16^-单核细胞共享表达程序（SMEP），包含42个上调差异基因，该程序在LMs患者的血液和胸腔积液样本中均呈激活状态，涉及炎症反应、细胞活化等关键通路，提示其为疾病进展的核心病理机制。通过药物-基因相互作用网络筛选，进一步揭示了S100A8可能是SMEP中的关键的促炎因子，并且可能成为疾病的药物靶点。在Vegfr3^+/-小鼠模型中，S100A8抑制剂帕喹莫德（paquinimod）可显著改善淋巴管畸形表型，验证了其治疗潜力。

本研究还做了其他层面的分析，例如与其他免疫性疾病的比较分析显示，LMs具有独特的免疫病理特征：免疫细胞广泛活化、炎症反应水平较高，但抗原提呈功能普遍受损，且NK细胞中抑制性受体KLRC1（编码NKG2A）选择性上调。这一发现不仅清晰勾勒出LMs区别于其他免疫性疾病的免疫失调轮廓，更从疾病异质性维度为理解LMs独特的免疫致病机制、开发精准分层的诊疗策略提供了关键的科学依据。

综上所述，本研究构建了全面的LMs免疫细胞图谱，系统阐明了细胞类型特异性的免疫失调模式，初步揭示了关键转录因子、免疫检查点分子及SMEP相关基因的病理作用，为LMs提供了潜在的生物标志物和治疗靶点。研究结果不仅深化了对LMs免疫病理机制的理解，也为临床药物重定位（如S100A8抑制剂）和精准治疗策略的开发提供了重要依据。