image: RUDN University biotechnologists have created a method for detection of bacterial infection in apple, pear, hawthorn and other plants of the Rosaceae family. The test does not require laboratory equipment, the result is ready in 10 minutes. This will allow detecting the disease quickly and prevent the spread of infection. view more
Credit: RUDN Unviersity
Les biotechnologues deRUDN University ont créé une méthode qui détecte les infections bactériennes dans les pommes, les poires, les aubépines et d'autres plantes de la famille des Rosacées. Le test ne nécessite pas de matériel de laboratoire et donne un résultat en 10 minutes. Cela vous permettra de détecter rapidement la maladie et d'empêcher la propagation de l'infection. Les résultats sont publiés dans la revue Physiological and Molecular Plant Pathology.
La bactérie Erwinia amylovora provoque une maladie infectieuse dangereuse chez les plantes : une brûlure bactérienne. La plupart des plantes de la famille des Rosacées y sont sensibles. Par exemple, l'aubépine, la pomme, la poire. En raison des bactéries, les inflorescences se fanent, les feuilles se dessèchent et s'enroulent et des ulcères nécrotiques se forment sur l'écorce. La maladie peut se propager par les plantes infectées, les outils de jardinage et le vent, qui transporte le liquide des plaies. Par conséquent, afin d'arrêter la propagation de l'infection à temps, vous avez besoin de moyens de la diagnostiquer rapidement et efficacement. Les méthodes de test existantes nécessitent un équipement de laboratoire et cela ralentit le diagnostic. Les biotechnologues de RUDN University ont développé une méthode qui vous permet d'obtenir des résultats en 10 minutes directement sur place.
« Dans la lutte contre Erwinia amylovora, il est important de diagnostiquer les maladies directement dans le jardin ou la pépinière, notamment pour surveiller les foyers de maladies ou surveiller de manière indépendante les jardins agricoles et privés. Par conséquent, nous avons décidé de développer un test express pour détecter les bactéries et de l'optimiser en comparant différentes parties de plantes infectées », Shiatesa Razo, doctorant à l'Institut agricole et technologique de RUDN University .
Le nouveau test est basé sur l'analyse immunochromatographique (ICA). C'est l'une des méthodes de diagnostic les plus polyvalentes. C'est ainsi que la plupart des tests rapides modernes qu'une personne rencontre (par exemple, un test de grossesse ou le SRAS-CoV-2) sont organisés. Une bandelette de test est placée dans un fluide biologique, tel qu'un extrait de feuille. Des anticorps spécifiques sont appliqués sur la bande, qui "se lient" à la substance souhaitée et tachent des zones spécifiques des bandes sont obtenues. Par leur quantité, on peut conclure qu'une substance particulière est présente dans le fluide biologique. La tâche des biotechnologues de RUDN University était de sélectionner des anticorps qui permettraient de déterminer la présence de la bactérie Erwinia amylovora dans la sève des plantes.
Pour obtenir des anticorps spécifiques, les biologistes ont réalisé une série d'inoculations d'Erwinia amylovora sur des lapins chinchillas. 7 à 10 jours après la dernière vaccination, les biologistes ont prélevé des échantillons de sang sur les animaux et en ont isolé l'immunoglobuline IgG nécessaire avec des cellules protéiques qui neutralisent l'agent pathogène.
Le test résultant a été testé sur des plantes infectées de la région de Voronej avec 121 échantillons de pomme, poire, aubépine, coing, prunellier et cerise. Le liquide d'essai a été isolé des feuilles, des brindilles, des fleurs, des fruits et du mucus bactérien. En conséquence, dans 93,5% des cas, les résultats du test express coïncidaient avec les résultats du test PCR, qui nécessite plus de temps et un équipement de laboratoire spécial. Les biotechnologues de RUDN University ont également déterminé qu'il est préférable d'utiliser des tissus végétaux conducteurs ,bois et liber pour l'analyse.
« Il existe un nombre croissant de méthodes d'analyse rapides et sensibles, en laboratoire et hors laboratoire. Cependant, l'échantillonnage dépend de la façon dont l'agent pathogène est distribué dans la plante. Nous avons déterminé quelles parties des plantes sont les plus appropriées pour détecter le feu bactérien à l'aide d'une analyse immunochromatographique. Par conséquent, nos résultats seront utiles pour un diagnostic plus efficace de la maladie dans des conditions non-laboratoires », Shiatesa Razo, étudiante de troisième cycle à l'Institut agricole et technologique de RUDN University .
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